كلية الطب البيطري جامعة حماة
مقالات مشابهة
| التصنيف: | رسالة دكتوراه |
| الكاتب: | مرشد عدنان كاسوحة |
| عنوان البحث: | عزل أنواع البوغيات الخفية وتنميطها جينياً باستخدام تقنية تعدد أشكال أطوال الشُدَف المُقتطـَعة |
| المشرف: | أ.د. عبد الكريم الخالد |
| الكلية: | كلية الطب البيطري |
| القسم / الاختصاص: | الأحيـــــــــــاء الدقيقة / علم الطفيليات |
| السنة: | 2018م |
ملخص باللغة العربية:Arabic Abstract
استخدم في هذه الدراسة تحليل PCR-RFLP بهدف تنميط أنواع البوغيات الخفية جينياً لأول مرة في سورية عند الإنسان والأبقار والدجاج. حيث جمعت 437 عينة براز وروث، تضمت 213 عينة من أطفال مصابين بالإسهال دون الخمس سنوات، و69 عينة إسهال من العجول الرضيعة، و 44 عينة من أبقارٍ بالغة سليمة ظاهرياً، و111 عينة جمعت من قطعان دجاج اللحم.
فُحصَت جميع العينات المجموعة بدايةً باستخدام صبغة كينيون الصامدة للحمض لتحديد المصابة والإيجابية منها، ومن ثم طُبِّق اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل المعشش nested-PCR على 41 عينة كانت إيجابية نتيجة الفحص السابق (19 من العجول، و 4 من الأبقار البالغة، و11 من دجاج اللحم، و 7 من الأطفال)، واستهدف اختبار nested-PCR المورثة المسؤولة عن الـ RNA الريباسي في الوحيدة الصغرى عند البوغيات الخفية، وأُتبِعَ هذا الاختبار بتحليل تعدد أشكال أطوال الشدف المقتطعة RFLP اعتماداً على ثلاثة إنزيمات قطع للـDNA هي Ssp I, Vsp I, Mbo II .
وأظهرت النتائج وجود نوعٍ واحدٍ عند كلٍ من الأطفال والعجول الرضيعة هو البوغة الخفية الصغيرة Cryptosporidium parvum ، ونوع واحد عند الأبقار البالغة هو البوغة الخفية الأندرسونية C. andersoni ، في حين وجد نوع البوغة الخفية البيلية C. baileyi لدى دجاج اللحم بالإضافة إلى نوعٍ آخر أظهر شاكلةً Profile غير معروفة بعد تحليل RFLP وذلك مقارنة مع الأنواع المعروفة والتي تصيب الدجاج.
ولإتمام الخطوات التي أنجزت في هذا العمل لابد من إجراء دراسات أخرى أوسع وأعمق تتضمن وتستهدف عدد من المورثات الإضافية، وسلسلتها وتحديد تحت الأنماط للأنواع الموجودة في القطر العربي السوري.
وبالإضافة إلى ما سبق تم عزل البيوض المتكيّسة وتنقيتها من إحدى العينات المجموعة من عجلٍ رضيعٍ مصاب، وتم استخدامها في دراسة الخمج التجريبي للبوغة الخفية الصغيرة عند الهمستر السوري الذهبي بعمر 5 أسابيع، والأرانب بعمر (5-7) أسابيع، وفي أجنة بيضِ الدجاج البلدي وبيض أمات الفروج.
قسمت كل من حيوانات الهمستر والأرانب إلى مجموعتين، ثُبِّطت إحدى المجموعتين لكلٍ من الهمستر والأرانب مناعياً باستخدام فوسفات الديكساميثازون، بينما لم تعط الأخرى أي مثبط مناعي، وأظهرت النتائج تكاثر الطفيلي في مجموعتي حيوانات الهمستر، في حين لم يسجل تكاثرها عند الارانب، وكانت أعداد البيوض المتكيسة في براز مجموعة حيوانات الهمستر المثبطة مناعياً أكبر، وبفرق معنوي واضح جداً p<0.01 مقارنة مع المجموعة الأخرى.
وتكاثرت البوغة الخفية الصغيرة في جميع البيوض المخصبة المحقونة (بيض الدجاج البلدي وبيض أمات الفروج) ضمن الكيس السقائي المشيمائي، وكانت أعدادها في السائل السقائي المشيمائي لبيض أمات الفروج بعد 7 أيام من الخمج، أكبر من تلك في بيض الدجاج البلدي وبفارق معنوي واضح جداً عند p<0.01.
يعد هذا العمل هو الأول الذي اعتمد على تحليل RFLP في تحديد نوع البوغة الخفية في سورية، والذي تم بنتيجته الكشف عن وجود البوغة الخفية الصغيرة، والبوغة الخفية الأندرسونية، والبوغة الخفية البيلية، وكانت حيوانات الهمستر بعمر خمسة أسابيع والمثبطة مناعياً الأكثر ملاءمة كحيوانات تجارب يستفاد منها في دراسات قادمة تستهدف هذا الطفيلي.